Legionella pneumophila serogrupper 1-14 direkt fluorescerande antikropps kit
Direkt fluorescerande antikroppsreagens avsett för presumtiv (serologisk) identifiering av Legionella pneumophila serogrupper 1 till 14 från kulturisolat.
Den vanligaste tillgängliga tekniken som används för laboratoriebekräftelse vid identifiering av legionellaisolat är serologiska metoder som baseras på hyperimmuna kaninantisera som innehåller antikroppar riktade mot den somatiska lipopolysackariden eller "O" antigen. Dock har många arter av Legionella och serogrupper gemensamma antigener. Korsreaktioner kan ses när polyklonala antikroppar används för serologisk identifiering. Legionella pneumophila serogrupper 1-14 DFA kit använder FITC märkta monoklonala antikroppar som erbjuder mycket känslig och specifik identifiering av Legionella pneumophila serogrupper 1 till 14.
Legionella kan odlas från en mängd olika kliniska prover och testet fluorescent antikropp (DFA) används för att identifiera Legionella i sådana kulturer. Även om DFA testet är känsligt och mycket specifikt bör diagnosen bekräftas genom biokemisk karaktärisering när det är möjligt.
Det direkta fluorescerande antikroppstestet är en av de snabbaste och enklaste immunofluorescensmetoderna. Monoklonala antikroppar riktade mot Legionella pneumophila serogrupper 1 till 14 antigener konjugeras till fluorokromen, fluoresceinisotiocyanat (FITC) för att bilda ett FITC-märkt antikropp-reagens.
Isolat som skall testas fixeras på ett objektglas och täcks med det monoklonala antikroppsreagenset. FITC-märkta antikroppar binder specifikt till Legionella pneumophila serogrupper 1 till 14-antigenet som finns i isolatet. Om Legionellaantigen inte finns närvarande i antikroppsreagenset sker ingen bindning och det FITC-märkt antikroppsreagenset avlägsnas i tvättsteget.
FITC-märkt antikropp-antigenkomplex detekteras genom exponering av objektglaset för ultraviolett eller blåviolett ljus. Excitation med ultraviolett eller blåviolett ljus orsakar att FITC fluorescerar på längre (synliga) våglängder och producerar en blå/grön eller gul/grön färg. Legionella-celler visas som ljust gul-gröna baciller under dessa förhållanden.